Protocolli di Microscopia

I protocolli di microscopia sono usati nelle bioscienze per osservare cellule, tessuti e microrganismi. I microscopi non sono tutti uguali. I microscopi ottici sono anche chiamati microscopi "ottici" e usano lenti e luce per ingrandire i campioni. Alcuni protocolli di microscopia ottica coinvolgono l'uso di materiali fluorescenti e campioni congelati. Mentre un microscopio ottico fornisce ingrandimento fino a 2.000 volte, un microscopio elettronico rende possibile ingrandimenti nell'ordine di 2 milioni di volte, perché usa un fascio di elettroni invece della luce visibile. I protocolli di microscopia elettronica includono la fissazione dei Protozoi, tra gli altri.

Protozoi per Microscopia Elettronica

I protozoi ciliati sono organismi microscopici che contengono filamenti esterni. Il microscopio elettronico è lo strumento ideale per osservare queste creature, che devono subire un processo chiamato fissazione, dove si usano sostanze chimiche come il tetrossido di osmio e l'acetato di uranile. Secondo Protocol Online, dopo la fissazione, le cellule vengono disidratate con etanolo e essiccate. Questo protocollo permette l'osservazione dei filamenti dei Protozoi con un microscopio elettronico.

Microscopia a Immunofluorescenza

I protocolli di microscopia a immunofluorescenza sono spesso usati con un microscopio ottico, molecole chiamate anticorpi e sostanze chimiche fluorescenti. Questi protocolli sono impiegati per osservare cellule isolate e anche tessuti, che devono essere preparati prima dell'osservazione. Fenilendiammina, glicerolo, bodipy falloidina e carbonato-bicarbonato sono usati nella soluzione, così come un anticorpo murino chiamato tubulina. Questa preparazione rende alcuni componenti cellulari fluorescenti, facilitando l'osservazione.

Sezioni Semi-Sottili Criogeniche per Microscopia Ottica

Secondo l'Ahmanson Center for Advanced Electron Microscopy and Imaging, il materiale biologico congelato può essere sezionato meglio a -130 gradi Fahrenheit, il che aiuta a preservare i dettagli cellulari per l'osservazione successiva. I campioni vengono immersi in azoto liquido e saccarosio. La sezionatura viene poi eseguita usando un crioultramicrotomo, uno strumento che può tagliare sezioni tre volte più sottili di una ragnatela. Il campione viene posto su un vetrino e rivestito con gelatina, un enzima chiamato poli-L-lisina o il colorante blu alcian.