Mezzi di Coltura USP <61> e <51>: Riferimento Completo per Test Limiti Microbici
USP <61> (Test di Conteggio Microbico) e USP <51> (Test di Efficacia Antimicrobica) richiedono specifici mezzi di coltura per risultati validi. La selezione del mezzo dipende dai microrganismi target e dal tipo di prodotto. Verifica sempre rispetto all'USP-NF attuale e alla tua monografia di prodotto.
USP <61> – Conteggio Microbico (Bioburden)
Scopo: Quantificare Conteggio Aerobico Totale (TAMC) e Conteggio Totale Combinato Lieviti/Muffe (TYMC).
| Mezzo | Target | Incubazione | Note Chiave |
|---|---|---|---|
| Agar Digesto di Soia-Caseina (SCDA / TSA) | TAMC (batteri) | 30–35°C, 3–5 giorni | Scopo generale; USP <61> default per batteri. Supporta un'ampia gamma. |
| Agar Conteggio Placca (PCA) | TAMC (batteri) | 30–35°C, 2–3 giorni | Alternativa a SCDA; profilo nutritivo più semplice. |
| Agar Sabouraud Dextrose (SDA) | TYMC (funghi) | 20–25°C, 5–7 giorni | pH basso (5,6) inibisce batteri; ricco di destrosio per funghi. |
| Agar Patata Dextrose (PDA) | TYMC (funghi) | 20–25°C, 5–7 giorni | Mezzo fungino alternativo; migliore per alcune muffe. |
Controlli Richiesti (USP <61>)
- Promozione della crescita: Sfida ogni mezzo con S. aureus, P. aeruginosa, B. subtilis (batteri); C. albicans, A. brasiliensis (funghi)
- Idoneità (Validazione del Metodo): Testa il prodotto nel mezzo – non deve inibire >50% del recupero rispetto al controllo
- Controllo negativo: Mezzo non inoculato – conferma sterilità
USP <51> – Test di Efficacia Antimicrobica (Sfida Conservante)
Scopo: Valutare l'efficacia del sistema conservante in prodotti non sterili. Inocula il prodotto con ceppi standardizzati; misura la riduzione log a 7, 14, 28 giorni.
| Mezzo | Uso | Incubazione | Note Chiave |
|---|---|---|---|
| Brodo Triptico di Soia (TSB) | Subcoltura batterica / diluizione / recupero | 30–35°C, 24–48h | Ricco, non selettivo. Per S. aureus, P. aeruginosa, E. coli. |
| Agar Triptico di Soia (TSA) | Conteggio batterico (conteggi su placa) | 30–35°C, 2–3 giorni | Forma agar del TSB. Diffusione superficiale o piastra di colata. |
| Brodo Sabouraud Dextrose (SDB) | Subcoltura fungina / diluizione / recupero | 20–25°C, 2–5 giorni | Per C. albicans, A. brasiliensis. |
| Agar Sabouraud Dextrose (SDA) | Conteggio fungino | 20–25°C, 3–5 giorni | Stesso mezzo fungino di USP <61>. |
Ceppi Inoculo Standard USP <51>
- Batteri: Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Escherichia coli ATCC 8739
- Funghi: Candida albicans ATCC 10231, Aspergillus brasiliensis ATCC 16404
Note Critiche di Conformità
- La monografia del prodotto prevale sul capitolo generale. Alcuni prodotti specificano mezzi, temperature o criteri di accettazione diversi.
- Neutralizzazione/validazione: Se il prodotto ha attività antimicrobica, devi validare la neutralizzazione (es. lecitina, polisorbato 80, istidina) nel mezzo.
- Filtrazione su membrana vs. conteggio su placa: USP <61> consente entrambi. La filtrazione è preferita per prodotti liquidi a basso bioburden.
- Armonizzazione: USP <61>/<51> armonizzato con EP 2.6.12/5.1.3 e JP. I nomi dei mezzi possono differire (es. EP: "Agar Digesto Caseina-Soia").
Fornitori Comuni di Mezzi
- BD/Difco, MilliporeSigma, Thermo Fisher (Oxoid), Hardy Diagnostics, Neogen, HiMedia
- Acquista come polvere disidratata (prepara internamente) o placche/tubetti pronti all'uso (con CoA)
Esegui sempre promozione della crescita e idoneità su ogni nuovo lotto di mezzi prima del rilascio del test QC.